膜再生液

產(chǎn)品貨號：M0500

保存條件：4℃

產(chǎn)品簡介：

使用膜再生液可以對同一張膜進行多次Western Blot 檢測。在室溫條件下，將用過的膜浸泡在膜再生液10-60分鐘，可在不影響抗原蛋白的情況下清除膜上結(jié)合的抗體。隨后，可以使用不同的抗體進行下一輪Western Blot 實驗。適宜從少量樣品多次檢測不同蛋白質(zhì)。即使樣品量并不匱乏，采用這一策略多次檢測同一張膜上的蛋白，能省去給藥處理、蛋白電泳和膜轉(zhuǎn)移等耗費性步驟。而且可以消除重新上樣而帶來的誤差，使可比性更強。

Western Blot 膜再生液特點：

無毒無味無害，室溫下使用；可對同一張膜進行5 次以上的Western Blot 檢測。

適用：清除硝酸纖維素膜或PVDF 膜上結(jié)合的抗體，不影響抗原蛋白。

使用方法:

1、將膜充分浸泡于適當(dāng)體積的再生液中，室溫洗脫10-20分鐘，具體時間長短應(yīng)該根據(jù)抗體特性進行優(yōu)化，洗脫某些抗體需較長時間，更有長達60分鐘之久。

2、取出膜，用洗滌液（TBST等）漂洗兩三次。

3、此時膜上抗體已除去，可重新封閉后再加入另一種抗體進行檢測。

注意事項：

1. 膜再生液實質(zhì)是在不影響膜上結(jié)合的抗原的條件下將抗體洗脫下來，實際操作中，膜類型、抗體類型、濃度及抗原特性都影響洗脫難易度。
2. 適用于 ECL 和類似的化學(xué)發(fā)光試劑進行的 Western 檢測。不適用于非化學(xué)發(fā)光試劑進行的 Western檢測，例如DAB，NBT/BCIP。
3. 用ECL 顯色后，再生液洗脫幾分鐘后，可再次加入ECL 顯色液顯影，如膠片上顯示條帶，表明抗體未除凈，須進一步在再生液中浸泡，至膠片上無顯色。
4. 使用脫脂奶粉封閉的膜要比使用BSA 封閉的膜更容易再生。
5. 盡量避免讓膜干燥。

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